2026年2月19日，美國斯坦福大學(xué) Bali Pulendran 教授研究團(tuán)隊(duì)，在國際期刊Science在線發(fā)表題為：Mucosal vaccination in mice provides protection from diverse respiratory threats的研究論文。研究人員開發(fā)了一款鼻噴的廣譜疫苗，在小鼠實(shí)驗(yàn)中成功抵御了包括SARS-CoV-2等多種呼吸道病毒、細(xì)菌甚至過敏原，提供長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月的廣泛保護(hù)。該研究改變了自十八世紀(jì)牛痘疫苗以來已延續(xù)200多年的“一病一苗"針對(duì)特定病原體的抗原進(jìn)行疫苗開發(fā)的模式。一項(xiàng)兼具科研突破性和臨床轉(zhuǎn)化性雙重價(jià)值的工作，為呼吸道疾病防控帶來全新革命性可能。

該研究團(tuán)隊(duì)開發(fā)出一種名為GLA-3M-052-LS+OVA的鼻內(nèi)噴霧疫苗。該疫苗不僅能同時(shí)防御多種不同的呼吸道病毒和細(xì)菌感染，還能減輕過敏性哮喘的癥狀，且保護(hù)效果持久。更重要的是，其保護(hù)作用并非依賴于針對(duì)特定病原體的抗體，而是通過“教育"和“重塑"肺部原位的免疫細(xì)胞，主要是肺泡巨噬細(xì)胞（AM）來實(shí)現(xiàn)的。

其機(jī)制核心在于“雙重激活"的策略：它結(jié)合了TLR4 激動(dòng)劑（Glucopyranosyl Lipid A：GLA，吡喃葡糖苷脂質(zhì) A）和TLR7/8 激動(dòng)劑（3M-052-LS），并搭配了一種通用模型抗原：卵清蛋白（ovalbumin：OVA） 。疫苗中的TLR4 激動(dòng)劑GLA 和TLR7/8 激動(dòng)劑3M-052-LS，能直接刺激肺部先天免疫細(xì)胞；另一方面，添加的無害通用抗原卵清蛋白（OVA）會(huì)將T細(xì)胞招募到肺部，這些抗原特異性 CD4?和 CD8?記憶T細(xì)胞會(huì)持續(xù)向先天免疫細(xì)胞發(fā)送信號(hào)，讓本應(yīng)僅活化幾天的先天免疫維持?jǐn)?shù)月激活狀態(tài)。這種“整合器官免疫"（integrated organ immunity）模式中，肺泡巨噬細(xì)胞（AMs）是關(guān)鍵執(zhí)行者。GLA-3M-052-LS+OVA疫苗會(huì)通過表觀遺傳重塑改造肺泡巨噬細(xì)胞，使其抗原呈遞能力、吞噬能力顯著增強(qiáng)，能快速清除病毒、細(xì)菌及受損細(xì)胞，同時(shí)限制過度炎癥反應(yīng)，避免細(xì)胞因子風(fēng)暴。該全新疫苗不含病原體任何組分，而是模擬呼吸道感染期間免疫細(xì)胞的交流信號(hào)，通過整合先天免疫和適應(yīng)性免疫，形成持續(xù)的廣譜免疫反饋回路。

傳統(tǒng)疫苗遵循 “抗原特異性"原則，需模擬病原體的獨(dú)特成分（如新冠病毒的刺突蛋白），讓免疫系統(tǒng)提前訓(xùn)練和記憶以識(shí)別目標(biāo)，但面對(duì)病原體突變或新病原體出現(xiàn)時(shí)極易失效，這就是流感疫苗年年打的核心原因。這一模式是自十八世紀(jì)牛痘疫苗以來已延續(xù)200多年。病毒會(huì)不斷進(jìn)化和變異，使得疫苗必須隨之更新。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，一種能夠?qū)苟喾N病原體的“廣譜疫苗"長(zhǎng)期以來被視為難以企及的夢(mèng)想。

研究者首先評(píng)估了鼻內(nèi)疫苗的效果，該疫苗結(jié)合了TLR4激動(dòng)劑GLA和TLR7/8激動(dòng)劑3M-052-LS與卵清蛋白（OVA），小鼠接受了四次鼻內(nèi)接種，并隨著時(shí)間評(píng)估對(duì)多種呼吸道病原體的抵抗力（Fig.1A）。在接種疫苗后第21天、第42天和第3個(gè)月用SARS-CoV-2進(jìn)行挑戰(zhàn)時(shí)，接種疫苗的小鼠相比未接種對(duì)照組表現(xiàn)出明顯減少的體重減輕（Fig.1B）。免疫組化、斑塊實(shí)驗(yàn)和qPCR分析證實(shí)，接種疫苗的小鼠SARS-CoV-2病毒載量和亞基因組RNA水平降低（圖S1A和B）。感染后第3天對(duì)肺組織進(jìn)行的組織學(xué)分析顯示，接種疫苗的小鼠炎癥和肺泡損傷減少（Fig.1C）。

進(jìn)一步研究顯示，接種疫苗可提供針對(duì)SARS-CoV MA15和SCHO14 MA15感染的交叉保護(hù)，證據(jù)包括病毒滴度降低、體重保持以及肺損傷減輕。三至四次免疫足以提供這種保護(hù)效果。經(jīng)流感病毒PR8預(yù)免疫并隨后接種含PR8抗原的核蛋白NP（GLA-3M-052-LS NP）的小鼠，在第28天和接種后2個(gè)月挑戰(zhàn)時(shí)表現(xiàn)出SARS-CoV-2病毒載量降低和體重減輕減少，這表明GLA-3M-052-LS可以利用預(yù)先存在的抗原特異記憶細(xì)胞提供異型保護(hù)。此外，接種疫苗的小鼠對(duì)金黃色葡萄球菌和鮑曼不動(dòng)桿菌的細(xì)菌感染表現(xiàn)出持久保護(hù)，接種后至少3個(gè)月肺部細(xì)菌載量明顯降低（Fig.1D–F）。為了確定鼻內(nèi)給藥的GLA-3M-052-LS OVA是否也能對(duì)通過非呼吸途徑獲得的感染提供保護(hù)，研究者評(píng)估了鼻內(nèi)接種是否可保護(hù)小鼠免受靜脈注射金黃色葡萄球菌感染。接種疫苗的小鼠與未接種小鼠相比，腎臟細(xì)菌載量較低，體重減輕減少。

最后，研究者評(píng)估了GLA-3M-052-LS OVA黏膜疫苗在免疫有經(jīng)驗(yàn)組織中的有效性，即接種了四個(gè)月前感染過PR8的小鼠。接種疫苗的非初次小鼠與未接種對(duì)照組相比肺部細(xì)菌載量降低，與接種疫苗的初次小鼠降低程度相似。這些結(jié)果表明，鼻內(nèi)GLA-3M-052-LS OVA在初次和有抗原經(jīng)驗(yàn)的宿主體內(nèi)均可誘導(dǎo)抗原無關(guān)聯(lián)的廣泛保護(hù)性免疫。

Fig.1 鼻內(nèi)GLA-3M-052-LS OVA疫苗接種可對(duì)SARS-CoV-2、PR8流感病毒、金黃色葡萄球菌以及肺炎鏈球菌感染提供強(qiáng)大且持久的保護(hù)

為了闡明支撐持久、非特異性保護(hù)的細(xì)胞機(jī)制，研究人員對(duì)GLA-3M-052-LS OVA免疫引發(fā)的先天性和適應(yīng)性反應(yīng)進(jìn)行了表征。鼻內(nèi)疫苗接種后，多種先天免疫細(xì)胞亞群上調(diào)了共刺激分子CD86，并且包括肺泡巨噬細(xì)胞（AM）、樹突狀細(xì)胞（DC）、單核細(xì)胞和F4/80+巨噬細(xì)胞在內(nèi)的抗原呈遞細(xì)胞（APC）在免疫接種后不久浸潤(rùn)了支氣管肺泡灌洗液（BAL）。雖然大多數(shù)先天免疫反應(yīng)在一周內(nèi)恢復(fù)到基線水平，但AM的激活至少保持升高90天（Fig.2A）。AM中的MHC-II表達(dá)以及AM和DC中的MHC-I表達(dá)在接種21天或3個(gè)月后仍保持升高，與持續(xù)的抗原呈遞能力一致。

研究人員使用流式細(xì)胞術(shù)評(píng)估了T細(xì)胞反應(yīng)。黏膜疫苗接種在肺部產(chǎn)生了高頻率的長(zhǎng)期存在的疫苗特異性（四聚體OVA特異性）CD4+和CD8+ T細(xì)胞（Fig.2B）。這些T細(xì)胞在抗原刺激下能夠產(chǎn)生細(xì)胞因子，如IFN-γ、IL-2、TNFα和IL-17A（Fig.2B）。此外，高頻率的CD8+和CD4+組織駐留記憶（tissue resident memory ：TRM）T細(xì)胞，這些T細(xì)胞被標(biāo)識(shí)為CD45+ TCRβ+ CD8+/CD4+ CD45(i.v.)- CD44+ CD69+ CD103+細(xì)胞，并在接種后至少3個(gè)月積累在疫苗接種的肺中（Fig.2C）。TRM在提供呼吸道病原體保護(hù)方面非常有效，而標(biāo)準(zhǔn)的肌內(nèi)注射疫苗通常不會(huì)誘導(dǎo)高水平的TRM。

接下來研究人員使用多因子檢測(cè)Luminex評(píng)估了細(xì)胞因子譜。免疫接種與BAL液中關(guān)鍵炎癥介質(zhì)的短暫但顯著升高相關(guān)，包括CXCL10、CCL5、CCL2和IFN-γ，反映了先天性和適應(yīng)性免疫途徑的有效激活。雖然大多數(shù)細(xì)胞因子水平在3天內(nèi)恢復(fù)正常，但干擾素誘導(dǎo)的趨化因子CXCL10、CCL5、可溶性核因子κB配體受體激活劑（sRANKL）和B細(xì)胞活化因子（BAFF）在第7天仍保持升高。血清中的炎癥性細(xì)胞因子水平明顯低于BAL液中的水平，表明疫苗誘導(dǎo)的細(xì)胞因子反應(yīng)主要局限于肺部。

為了捕捉全系統(tǒng)的長(zhǎng)期轉(zhuǎn)錄動(dòng)態(tài)，研究者對(duì)在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)收集的119,876個(gè)肺細(xì)胞進(jìn)行了單細(xì)胞RNA測(cè)序（scRNA-seq）。細(xì)胞聚類分析顯示，在疫苗接種后21天，2型常規(guī)樹突狀細(xì)胞（DC2）、間質(zhì)巨噬細(xì)胞（IM）、纖毛上皮細(xì)胞和肺泡巨噬細(xì)胞（AM）中抗原呈遞通路富集，并且在纖毛細(xì)胞和AM_2群體中，基因表達(dá)水平至少持續(xù)3個(gè)月。ATII細(xì)胞和AM_2群體表現(xiàn)出抗原呈遞相關(guān)基因的持續(xù)上調(diào)，如H2-D1、H2-K1、H2-Q7、H2-Aa和CD74。通過對(duì)總計(jì)96,834個(gè)肺細(xì)胞進(jìn)行了scATAC-seq，揭示了在未接種、接種21天及接種90天組之間顯著不同的染色質(zhì)可及性模式（Fig.2D）。與抗原呈遞基因H2-Aa、干擾素刺激基因Ccl5、Ifnor2、炎癥調(diào)控基因Il1orb以及膜脂運(yùn)輸?shù)鞍譍RAM結(jié)構(gòu)域含量蛋白1B(Gramdlb)相關(guān)的染色質(zhì)位點(diǎn)，在疫苗接種后至少3個(gè)月內(nèi)在AM中保持可檢測(cè)到（Fig.2E）。轉(zhuǎn)錄因子（TF）基序分析顯示AP-1家族（包括Fos、Fosb、Jund、Jun和Junb）在多種群體中富集，包括T細(xì)胞、ATII、AM、IM、1型常規(guī)樹突狀細(xì)胞（DC1）、中性粒細(xì)胞、纖毛細(xì)胞及單核細(xì)胞。多種AP-1、STAT、IRF及NF-kB家族的TF基序在多種T細(xì)胞群體及AM中至少在接種后3個(gè)月保持可檢測(cè)，與訓(xùn)練免疫特征一致（Fig.2F）。

因此，GLA-3M-052-LS OVA疫苗接種引發(fā)了強(qiáng)大而持久的免疫反應(yīng)，其特征為誘導(dǎo)抗原特異性駐留記憶T細(xì)胞（TRM）及上皮細(xì)胞和先天免疫細(xì)胞，尤其是肺泡巨噬細(xì)胞（AM）的持續(xù)重編程，并通過持續(xù)的表觀遺傳和轉(zhuǎn)錄改變促進(jìn)了增強(qiáng)的抗原呈遞和抗病毒狀態(tài)。

Fig2. 鼻腔內(nèi)GLA-3M-052-LS OVA疫苗在先天免疫激活的同時(shí)，誘導(dǎo)強(qiáng)勁且持久的抗原特異性TRM反應(yīng)，并驅(qū)動(dòng)協(xié)調(diào)的表觀基因組重塑肺泡巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞

為了剖析適應(yīng)性免疫對(duì)疫苗誘導(dǎo)的非特異性保護(hù)的潛在貢獻(xiàn)，研究者比較了帶有或不帶OVA抗原的GLA-3M-052-LS疫苗的效果。盡管兩種配方在接種21天時(shí)都提供了部分保護(hù)，但疫苗配方中必須添加OVA才能在接種后42天和3個(gè)月防止體重下降。這表明長(zhǎng)期異源保護(hù)需要適應(yīng)性免疫反應(yīng)。在整個(gè)GLA-3M-052-LS + OVA免疫方案中耗竭小鼠的CD4+和CD8+ T細(xì)胞會(huì)導(dǎo)致疫苗介導(dǎo)的SARS-CoV-2保護(hù)消失，因?yàn)轶w重下降和肺部病理表現(xiàn)與未接種小鼠相似（Fig.3A）。此外，在耗竭CD4+和CD8+ T細(xì)胞的小鼠中，GLA-3M-052-LS + OVA在感染金黃色葡萄球菌后的細(xì)菌負(fù)荷保護(hù)也消失了（Fig.3A）。單獨(dú)耗竭CD4+或CD8+ T細(xì)胞不足以消除GLA-3M-052-LS + OVA的保護(hù)作用，這表明這兩類T細(xì)胞具有冗余作用（Fig.3A）。在BCG疫苗接種的背景下，CD4+ T細(xì)胞幫助對(duì)于先天免疫細(xì)胞的廣泛保護(hù)作用是必需的。因此，研究人員評(píng)估了T細(xì)胞耗竭是否影響了模型中先天免疫細(xì)胞的訓(xùn)練。在CD4+和CD8+ T細(xì)胞被耗竭的小鼠中，GLA-3M-052-LS + OVA刺激下的AM、F4/80+巨噬細(xì)胞和DC亞群中CD86的表達(dá)較接種對(duì)照小鼠下降（Fig.3B）。T細(xì)胞的清除還減少了AM中MHC-II的上調(diào)，并改變了肺中中性粒細(xì)胞的頻率，以及BAL中DC的浸潤(rùn)。這些發(fā)現(xiàn)表明存在一個(gè)反饋環(huán)路，將抗原特異性T細(xì)胞反應(yīng)與組織駐留先天免疫編程聯(lián)系起來，并且對(duì)于建立寬廣、異質(zhì)的保護(hù)性免疫是必需的。

接下來對(duì)未接種小鼠、接種小鼠以及在免疫過程中耗竭CD4和CD8 T細(xì)胞的接種小鼠的肺進(jìn)行了單核空間轉(zhuǎn)錄組分析。對(duì)53,645個(gè)空間解析的細(xì)胞核進(jìn)行UMAP投影，揭示了多樣的肺細(xì)胞群，包括肺泡上皮細(xì)胞、AM、間質(zhì)巨噬細(xì)胞（IM）、DC、T細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞（Fig.3C）。空間聚類和轉(zhuǎn)錄特征映射顯示各組在組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞組成上存在顯著差異，接種小鼠肺中表現(xiàn)出顯著的空間重構(gòu)（Fig.3D）。使用血液轉(zhuǎn)錄模塊（BTMs）對(duì)接種和未接種小鼠進(jìn)行通路水平比較顯示，接種小鼠的AM中抗原呈遞、吞噬作用和抗病毒免疫激活特征上調(diào)。然而，這些現(xiàn)象在T細(xì)胞耗竭小鼠中消失（Fig.3E）。

聚焦于T細(xì)胞，研究人員識(shí)別出富含TRM相關(guān)基因（包括Itgae、Itgal、Runx3）的不同轉(zhuǎn)錄簇?？臻g定位分析證實(shí)，TRM CD8 T細(xì)胞和記憶CD4 T細(xì)胞在接種疫苗的肺部中優(yōu)先積累，而在T細(xì)胞耗竭的小鼠中，其頻率和空間駐留明顯下降。整合空間定位和受體-配體表達(dá)譜分析細(xì)胞間通訊強(qiáng)度顯示，疫苗接種后肺部的相互作用整體增強(qiáng)（Fig.3F）。T細(xì)胞-B細(xì)胞和T細(xì)胞-先天免疫細(xì)胞間的通訊增強(qiáng)，以及AM與肺泡上皮細(xì)胞（ATI和ATII）之間的信號(hào)傳導(dǎo)加強(qiáng)，而在T細(xì)胞耗竭小鼠中這些信號(hào)均被削弱。為了進(jìn)一步解析疫苗效力背后的分子介導(dǎo)因素，研究人員評(píng)估了T細(xì)胞與先天免疫細(xì)胞之間關(guān)鍵免疫調(diào)節(jié)通路的作用。蛋白R(shí)ANKL是T細(xì)胞驅(qū)動(dòng)的先天免疫細(xì)胞生存和抗原呈遞調(diào)節(jié)的關(guān)鍵介質(zhì)，在GLA-3M-052-LS +OVA免疫的BAL液中含量豐富。在免疫接種期間持續(xù)耗竭RANKL，通過使用抗RANKL抗體，會(huì)消除疫苗誘導(dǎo)的SARS-CoV-2和金黃色葡萄球菌的保護(hù)，使體重下降和細(xì)菌載量加重，相較于在使用非特異性同型對(duì)照抗體的情況下接種GLA-3M-052-LS+OVA的小鼠。然而，藥理學(xué)抑制CD40L、IFN-γ或TNF-α信號(hào)通路并不影響疫苗誘導(dǎo)的保護(hù)。這些結(jié)果表明，RANKL在GLA-3M-052-LS   OVA誘導(dǎo)的保護(hù)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。

Fig3. 抗原特異性T細(xì)胞協(xié)調(diào)先天免疫細(xì)胞與肺上皮細(xì)胞之間的相互作用

由于GLA-3M-052-LS OVA在AMs中誘導(dǎo)了持久的表觀遺傳變化，研究者旨在評(píng)估這種表觀遺傳變化在AM中介導(dǎo)非特異性保護(hù)的作用。通過在病毒挑戰(zhàn)前經(jīng)鼻腔給藥荷蘭Liposoma氯膦酸鹽脂質(zhì)體Clodronate Liposomes來清除AMs，連續(xù)兩次給藥策略能清除90%肺泡巨噬細(xì)胞。流感病毒PR8挑戰(zhàn)，肺泡巨噬細(xì)胞的清除會(huì)導(dǎo)致更多的體重減輕和更差的存活率（Fig.4A）。對(duì)金黃色葡萄球菌（S. aureus）的感染，清除肺泡巨噬細(xì)胞后，肺部有更高的病原載量（Fig.4B），疫苗接種后的保護(hù)作用隨著肺泡巨噬細(xì)胞的清除而幾乎消失，基本和未接種的小鼠相當(dāng)。無論流感病毒PR8，還是金黃色葡萄球菌（S. aureus），肺泡巨噬細(xì)胞的清除實(shí)驗(yàn)，證實(shí)了肺泡巨噬細(xì)胞是廣譜疫苗防護(hù)功能的執(zhí)行者。肺泡巨細(xì)胞回輸實(shí)驗(yàn)（Fig.4C）顯示，回輸疫苗接種過的肺泡巨細(xì)胞，Naive小鼠面對(duì)PR8病毒挑戰(zhàn)時(shí)有更強(qiáng)的抵抗體重丟失能力，進(jìn)一步證實(shí)了肺泡巨噬細(xì)胞的保護(hù)性作用。來自接種疫苗小鼠的AMs表現(xiàn)出對(duì)AF594標(biāo)記的S. aureus（Fig.4E）、凋亡和壞死中性粒細(xì)胞（Fig.4F）以及PR8感染的肺上皮細(xì)胞（Fig.4G）在體內(nèi)的更高攝取能力，相比之下未接種疫苗小鼠的AMs則較低。此外，接種疫苗小鼠的AMs在PR8感染后上調(diào)了活化標(biāo)志物，包括CD86、MHC-I和MHC-II，并在6小時(shí)內(nèi)積累在肺泡空間中。此外，基于空間轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，接種疫苗后的訓(xùn)練AMs表現(xiàn)出增強(qiáng)的抗原呈遞給T細(xì)胞的能力（例如，H2-Ab1:CD4, H2-K1:CD8, CD80:CD28）、促進(jìn)上皮細(xì)胞的炎癥和組織修復(fù)（例如，Illa/Illb:Illr1/Illrap, Tgfbl:Tgfbr1/2），并促進(jìn)趨化和免疫細(xì)胞的募集（例如，Cxcl10: Cxcr3, Ccl3:Cerl, Cxcl11: Cxcr3）。還有，AMs對(duì)T細(xì)胞、肺泡細(xì)胞和成纖維細(xì)胞表現(xiàn)出增強(qiáng)的粘附和識(shí)別能力（例如，Icaml:Itgal, Jam3:Jam2, Fnl:CD44）。這些結(jié)果表明，訓(xùn)練過的AMs作為疫苗誘導(dǎo)保護(hù)的關(guān)鍵早期效應(yīng)器，表現(xiàn)出增強(qiáng)的功能活性。

Fig4. 肺泡巨噬細(xì)胞協(xié)調(diào)疫苗誘導(dǎo)的非特異性保護(hù)

為了研究感染后的空間組織和免疫動(dòng)態(tài)，研究者對(duì)接種疫苗和未接種疫苗的小鼠肺組織進(jìn)行了多重空間蛋白成像和組織病理分析，并對(duì)其進(jìn)行了SARS-CoV-2挑戰(zhàn)。挑戰(zhàn)后第三天，接種疫苗的小鼠感染SARS-CoV-2的肺表現(xiàn)出明顯的空間重編程，如RSN基于t-SNE聚類所示（Fig.5，A至C）。接種疫苗肺組織中富集的區(qū)域以免疫密集微環(huán)境頻率增加為特征，包括顯示出大量輔助（CD4+）和細(xì)胞毒性（CD8+）T細(xì)胞、B細(xì)胞、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的區(qū)域3和5（Fig.5D）。這些細(xì)胞在空間上被組織成類似于淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)的T細(xì)胞區(qū)和B細(xì)胞區(qū)，表明新生三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)（tertiary lymphoid structure：TLS）形成加速（Fig.5E）。同時(shí)，免疫組化顯示TLS與SARS-CoV-2 N蛋白共定位（Fig.5E）。未接種疫苗的對(duì)照組在感染后第3天未顯示這些TLS特征?？臻g分布分析顯示，TLS富集區(qū)（區(qū)域3）主要定位于氣道周圍，提示疫苗接種使肺組織在感染時(shí)能夠快速且有結(jié)構(gòu)地參與免疫應(yīng)答。

與這些發(fā)現(xiàn)一致，接種疫苗的小鼠在肺中顯示抗原特異性NP四聚體CD8+ T細(xì)胞的加速積累（Fig.5，F(xiàn)和G），同時(shí)在BAL液中總IgG和IgG2c的HA特異性水平升高（Fig.5H）。這些免疫反應(yīng)與BAL液中促炎細(xì)胞因子的表達(dá)下降相關(guān)，包括IL-6、CXCL10、CCL2和GM-CSF，這是細(xì)胞因子風(fēng)暴的重要介質(zhì)（Fig.5I）。此外，疫苗接種顯著減輕肺部病理變化，并在6小時(shí)內(nèi)促進(jìn)免疫細(xì)胞向支氣管區(qū)域的早期募集，動(dòng)態(tài)組織病理分析顯示了這一點(diǎn)（Fig.5J）。在感染前，無論接種與否的小鼠均未觀察到免疫細(xì)胞聚集，表明該反應(yīng)是由病原體挑戰(zhàn)特異性觸發(fā)的（Fig.5J）。因此，GLA-3M-052-LS OVA疫苗促進(jìn)了組織特異性免疫微環(huán)境的建立，從而加快抗原呈遞和協(xié)調(diào)免疫應(yīng)答，實(shí)現(xiàn)對(duì)感染的早期控制并限制免疫病理損傷（未發(fā)生“細(xì)胞因子風(fēng)暴"）。

Fig5. 疫苗接種促進(jìn)三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)的快速形成和感染后炎癥的協(xié)調(diào)

由于組合性TLR4和TLR7激動(dòng)劑能夠引發(fā)強(qiáng)烈的Th1偏向性免疫反應(yīng)，研究人員推測(cè)這種黏膜疫苗接種策略也可能抑制由Th2驅(qū)動(dòng)的超敏反應(yīng)性疾病，如塵螨（HDM）誘導(dǎo)的哮喘。接種疫苗的小鼠表現(xiàn)出嗜酸性粒細(xì)胞和先天淋巴樣細(xì)胞2型（ILC2）浸潤(rùn)減少，表達(dá)IL4、IL5和IL13的Th2細(xì)胞減少，以及血清IgE水平低于未接種對(duì)照組（Fig.6，A至I）。這些作用至少持續(xù)三個(gè)月（Fig.6，A至I）。PAS染色的肺組織切片的組織學(xué)分析進(jìn)一步顯示黏液過度分泌減少（Fig.6J），確認(rèn)GLA-3M-O52-LS+OVA有效緩解了過敏性哮喘。

Fig6. 鼻內(nèi)GLA-3M-052-LS OVA疫苗接種可對(duì)過敏性哮喘提供強(qiáng)效且持久的保護(hù)

研究團(tuán)隊(duì)表示，這款疫苗的優(yōu)勢(shì)不僅在于廣譜性和持久性，還具備良好的臨床轉(zhuǎn)化潛力。GLA和3M-052均已進(jìn)入臨床評(píng)估階段，安全性有保障、鼻噴給藥方式便捷、無需注射，更易推廣。未來優(yōu)化為2劑接種方案后，可通過鼻噴劑實(shí)現(xiàn)大規(guī)模部署。若能成功轉(zhuǎn)化至人類，它有望取代每年多次的季節(jié)性疫苗接種，在新流行病出現(xiàn)時(shí)快速提供基礎(chǔ)防護(hù)，同時(shí)覆蓋流感、新冠、呼吸道合胞病毒、普通感冒、細(xì)菌性肺炎及常見過敏原，真正實(shí)現(xiàn) “一噴防多防"。當(dāng)然，轉(zhuǎn)化面臨挑戰(zhàn)，比如人類比小鼠接觸過更多微生物和環(huán)境抗原，肺部免疫背景更為復(fù)雜（有效性）；TLR激動(dòng)劑作為佐劑，其強(qiáng)度需要精細(xì)平衡，確保在有效激活免疫的同時(shí)不引起過度或有害的炎癥（安全性）；RANKL信號(hào)在肺泡巨噬細(xì)胞重編程中的具體下游通路響應(yīng)傳導(dǎo)（機(jī)制性）。

總之，研究人員揭示了一個(gè)完整的“整合器官免疫"環(huán)路。鼻噴疫苗GLA-3M-O52-LS+OVA在肺部誘導(dǎo)產(chǎn)生抗原特異性組織駐留記憶T細(xì)胞。這些T細(xì)胞通過分泌RANKL，持久地重編程肺泡巨噬細(xì)胞（AM），促進(jìn)活化，增強(qiáng)其吞噬、抗原呈遞和快速響應(yīng)能力。被免疫訓(xùn)練的肺泡巨噬細(xì)胞作為常備軍，提供廣譜的、抗原非依賴的防御。當(dāng)感染真實(shí)發(fā)生時(shí)，這個(gè)預(yù)置的免疫環(huán)境能加速三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)形成，快速招募和擴(kuò)增病原體特異性T細(xì)胞和B細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)“先天性免疫快速清除+適應(yīng)性免疫精準(zhǔn)打擊" 的雙重防護(hù)，并限制過度炎癥反應(yīng)而未產(chǎn)生“細(xì)胞因子風(fēng)暴"。 先天性免疫和獲得性免疫反應(yīng)的雙重效應(yīng)被“整合器官免疫"斡旋得恰到好處。

荷蘭Liposoma是巨噬細(xì)胞清除劑Clodronate Liposomes氯麟酸鹽脂質(zhì)體的發(fā)明人和開發(fā)者。作為L(zhǎng)eader的體內(nèi)單核巨噬細(xì)胞清除試劑，其憑借穩(wěn)定的化學(xué)性質(zhì)、高效的清除能力及良好的生物相容性，已成為業(yè)界單核巨噬細(xì)胞清除的不二試劑。產(chǎn)品被引頻頻見刊Cel,Nature和Science，助力突破發(fā)現(xiàn)，拓展科學(xué)邊界。

本Science論文，研究人員就使用了荷蘭Liposoma的巨噬細(xì)胞清除劑氯膦酸鹽二鈉脂質(zhì)體Clodronate Liposomes，貨號(hào)CP-005-005，通過建模前鼻腔吸入2次，50ul/次來清除肺泡巨噬細(xì)胞（AM），證明了肺泡巨噬細(xì)胞的執(zhí)行者角色 。

產(chǎn)品被引：

原始文獻(xiàn)：

Haibo Zhang et al., Mucosal vaccination in mice provides protection from diverse respiratory threats. Science(2026),

eaea1260, DOI:10.1126/science.aea1260